淼靈質粒使用說明書

      產品規格0.5~2μg質粒干粉,保證能轉化出來,不保證具體含量,請務必轉化提取后再使用。
      保質期限:90天,請盡快轉化。
     
保存溫:一般在-20℃,置于-80℃保存時間更長。
      運輸方式:常溫運輸,1周內。
      注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗性、感受態和培養溫度。(請向區域負責人QQ索要質粒信息目錄)
      使用說明
   
         1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質粒,室溫放置1min;
            2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;
            3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min;
            4、42℃熱激90s,再冰浴2min;
            5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min;
            6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;
            7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;
            8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h;
            9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒。

注意:1、如果您收到的是甘油菌種,請先四區劃線,挑取單克隆培養。
            2、如果第二天轉化平板長的過多,請將質粒按比例稀釋后再轉化。

下面是成功轉化的參考圖片:

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